Создание аппаратурно-технологической линии для культивирования модифицированных линий клеток млекопитающих, экспрессирующих рекомбинантные белки
https://doi.org/10.35825/2587-5728-2017-1-1-33-41
EDN: yoiibn
Аннотация
Представлены данные по созданию аппаратурно-технологической линии для культивирования модифицированных линий клеток млекопитающих, экспрессирующих рекомбинантные белки. В ее состав входят три участка: участок для создания измененных линий клеток млекопитающих с применением современных молекулярно-биологических инструментов; участок для осуществления масштабируемого культивирования генетически модифицированных линий клеток млекопитающих; участок для выделения и очистки рекомбинантных полипептидов с использованием валидированных методов. В рамках экспериментального исследования осуществлено выращивание клеток линии СНО-S, продуцирующей рекомбинантный белок GP вируса Эбола, суспензионным способом в ферментерах волнового и перемешивающего типов. Установлено преимущество в накоплении биомассы клеток и целевого белка в ферментерах волнового типа. Из культуральной жидкости выделен и очищен рекомбинантный полипептид GP со степенью чистоты более 95 %. При изучении антигенной полноценности рекомбинантного белка GP методами ИФА и вестерн-блота установлено соответствие его структуры нативному гликопротеину возбудителя лихорадки Эбола.
Об авторах
И. А. Чуркин
Федеральное государственное бюджетное учреждение «48 Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны Российской Федерации
Россия
Россия
Чуркин Игорь Алексеевич. Начальник отдела, канд. биол. наук
141306, г. Сергиев Посад, ул. Октябрьская, д. 11
С. В. Борисевич
Федеральное государственное бюджетное учреждение «48 Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны Российской Федерации
Россия
Россия
Борисевич Сергей Владимирович. Начальник института, д-р биол. наук, проф, член-корр. РАН
141306, г. Сергиев Посад, ул. Октябрьская, д. 11
Д. А. Кутаев
Федеральное государственное бюджетное учреждение «48 Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны Российской Федерации
Россия
Россия
Кутаев Дмитрий Анатольевич. Заместитель начальника института по научно-исследовательской работе, канд. биол. наук
141306, г. Сергиев Посад, ул. Октябрьская, д. 11
В. Т. Лымарь
Федеральное государственное бюджетное учреждение «48 Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны Российской Федерации
Россия
Россия
Лымарь Владимир Тимофеевич. Старший научный сотрудник отдела, д-р мед. наук
141306, г. Сергиев Посад, ул. Октябрьская, д. 11
Ю. И. Пащенко
Федеральное государственное бюджетное учреждение «48 Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны Российской Федерации
Россия
Россия
Пащенко Юрий Иванович. Ведущий научный сотрудник отдела, д-р биол. наук, проф.
141306, г. Сергиев Посад, ул. Октябрьская, д. 11
Е. В. Гордеев
Федеральное государственное бюджетное учреждение «48 Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны Российской Федерации
Россия
Россия
Гордеев Евгений Владимирович. Заместитель начальника отдела
141306, г. Сергиев Посад, ул. Октябрьская, д. 11
В. С. Кулиш
Федеральное государственное бюджетное учреждение «48 Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны Российской Федерации
Россия
Россия
Кулиш Вячеслав Сергеевич. Заместитель начальника отдела, канд. биол. наук
141306, г. Сергиев Посад, ул. Октябрьская, д. 11
Т. М. Плеханова
Федеральное государственное бюджетное учреждение «48 Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны Российской Федерации
Россия
Россия
Плеханова Тамара Михайловна. Старший научный сотрудник отдела, канд. биол. наук
141306, г. Сергиев Посад, ул. Октябрьская, д. 11
Р. А. Хамитов
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов»
Россия
Россия
Хамитов Равиль Авгатович. Заместитель директора по стратегическому развитию, д-р мед. наук, проф.
117545, г. Москва, 1-й Дорожный проезд, д. 1
Е. Н. Сауткина
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов»
Россия
Россия
Сауткина Елена Николаевна. Заведующая отделом медицинской биотехнологии, канд. хим. наук
117545, г. Москва, 1-й Дорожный проезд, д. 1
Список литературы
1. Егоров Н.С., Самуилов В.Д. Современные методы создания промышленных штаммов микроорганизмов. Биотехнология. Кн. 2. М.: Высшая школа, 1988.
2. Прищеп Т.П., Чучалин В.С., Зайков К.Л., Михалева Л.К., Белова Л.С. Основы фармацевтической биотехнологии. Ростов-на-Дону: Феникс, Томск: Издательство НТЛ; 2006.
3. Глик Б., Пастернак Дж. Молекулярная биотехнология. Принципы и применение. М.: Мир; 2002.
4. Глебов О.К. Генетическая трансформация соматических клеток // Методы культивирования клеток / Под ред. Пинаева ГП. Л.: Наука; 1988. С. 205–221.
5. Jayapal K.P., Wlaschin K.F., Hu W.S. Recombinant protein therapeutics from CHO cells — 20 years and counting // SBE Special Section. 2007. Р. 40–47.
Рецензия
Для цитирования:
Чуркин И.А., Борисевич С.В., Кутаев Д.А., Лымарь В.Т., Пащенко Ю.И., Гордеев Е.В., Кулиш В.С., Плеханова Т.М., Хамитов Р.А., Сауткина Е.Н. Создание аппаратурно-технологической линии для культивирования модифицированных линий клеток млекопитающих, экспрессирующих рекомбинантные белки. Вестник войск РХБ защиты. 2017;1(1):33-41. https://doi.org/10.35825/2587-5728-2017-1-1-33-41. EDN: yoiibn
For citation:
Churkin I.A., Borisevich S.V., Kutaev D.A., Lymar V.T., Pashchenko Yu.I., Gordeev E.V., Kulish V.S., Plekhanova T.M., Khamitov R.A., Sautkina E.N. The Creation of Technological Lines for the Cultivation of Modified Lines of Mammalian Cells Expressing Recombinant Proteins. Journal of NBC Protection Corps. 2017;1(1):33-41. (In Russ.) https://doi.org/10.35825/2587-5728-2017-1-1-33-41. EDN: yoiibn
Просмотров:
273
Послать статью по эл. почте 